1、外植体
选生长健壮、无病虫害的红花继木茎尖、芽及枝等作外植体,其中外植体采集在7~8月最好,污染率较低。
2、培养基
红花继木的组织培养包括初代培养、继代增殖培养和生根培养。试验表明,初代培养和继代增殖培养基可参考MS+BA1.0mg/l+IBA1.0mg/l;生根培养基可参考1/2MS+NAA1.0~1.5mg/l+0.1%的活性炭。
3、培养条件
红花继木的培养条件一般为:温度20℃左右,光照时间14h/d(每天14小时),光照强度为1500LX(勒克斯)。
操作步骤
(1)外植体消毒:材料采回后,及时用稀薄的漂白粉溶液洗去材料上的污物,而后用自来水反复冲洗20分钟,直至冲洗干净备用。
(2)接种:在接种前,先将接种室内的紫外灯开约20分钟进行消毒,然后打开接种台上的鼓风机吹十分钟左右,即可进入接种室进行接种操作。将消好毒的外植体放于超净工作台上,首先,在无菌条件下用70%酒精或0.01%升汞在常温下浸泡材料消毒10分钟,再用无菌水冲洗3~4次。然后用消毒的镊子夹取材料置于培养基上进行无菌培养。注意接种时所用的镊子需先在70%的酒精中消毒,并在酒精灯上烧一下再用,以求更好消毒,避免接种外植体感染。
当芽长至2厘米左右时,切取芽端接种在增殖培养基上分化增殖,然后将继代增殖的丛生芽分别移至生根培养基中诱导生根,当根长至1~2厘米长时,从培养室中取出炼苗,以备移栽。
(1)繁殖速度快:从优良母株上取下一个芽或一部分组织,理想条件下一年能繁殖几万到十几万株新的个体,所以组培技术最适合大量快速繁殖名贵和稀有植物。
(2)脱毒快繁:真菌、细菌、特别是病毒对植物的危害越来越大,已受到人们的重视,而采用植物茎尖进行组织培养,则是一项最有效、最快捷、最实用的方法。
(3)辅助育种:组培技术是单倍体育种、遗传性状研究、保留种质资源的一条有效途径。
(4)组培苗性状一致:用组培技术繁殖的植株来自于一个亲本主体,所以能够保持后代植株具有高度的一致性和整齐度。
(5)不受亲本限制:由于组培苗是采用无性繁殖技术培育植株,所以不受亲本不开花、不结籽及杂交品种后代易变异等品种特性的影响,可繁殖不育、杂交品种及易变异品种。
(6)不受季节限制:组培生产采用人工光照,室内培养,可以周年生产。
(7)节省土地和资源:由于组培生产可以在室内集中生产,立体分层生产,集中管理,能够最大限度地节省土地、人力等,符合现代农业的发展方向。